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浅谈人钙黏素ELISA试剂盒的实验原理和注意事项

 发布时间:2022-10-18 点击量:537
  人钙黏素ELISA试剂盒的实验原理:
 
  该试剂盒使用双抗体夹心法测定样本中的人钙粘蛋白1(PCDH1)水平。用纯化的人钙粘蛋白1(PCDH1)抗体包被微孔板制备固相抗体。依次将原钙粘蛋白1(PCDH1)加入单克隆抗体包被的微孔板中,然后与HRP标记的原钙粘素1(PCDH1)抗体结合形成抗体-抗原-酶标记的抗体复合物。*清洗后,添加基质TMB以显色。
 
  TMB在HRPase的催化下转化为蓝色,在酸的作用下最终转化为黄色。样品中的颜色深度与PCDH1呈正相关。使用微孔板阅读器测量450nm波长处的吸光度(OD值),并通过标准曲线计算样品中PCDH1的含量。
 
  人钙黏素ELISA试剂盒的使用注意事项:
 
  1、试剂盒应在取出冷藏环境并在室温下平衡15-30分钟后使用。如果酶标签的涂层板在启封后没有用完,则应将该条储存在密封袋中。
 
  2、浓缩洗涤液可能结晶,稀释时可在水浴中加热溶解,洗涤时不影响结果。
 
  3、样品添加的每个步骤都应使用取样器,并应经常检查其精度,以避免试验误差。每次采样时间最好控制在5分钟内。如果样本数量较大,建议使用喷枪进行采样。
 
  4、请在每次测量的同时制作标准曲线,最好制作多个孔。如果样品中待测物质的含量过高,请在测量前用样品稀释剂稀释一定次数(n次),然后在计算时乘以总稀释比(×n×5)。
 
  5、密封膜只能使用一次,以避免交叉污染。
 
  6、使基板远离光线。
 
  7、严格按照说明书进行操作,测试结果必须根据微板阅读器读数确定。
 
  8、所有样品、洗涤液和各种废物应作为传染性物质处理。

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