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解析人蛋白ELISA试剂盒的检测原理和性能特点

 发布时间:2022-09-14 点击量:943
  人蛋白ELISA试剂盒供科研使用,定量检测血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液等相关样本中人白蛋白(ALB)的浓度。
 
  人蛋白ELISA试剂盒的检测原理:
 
  应用双抗体夹心法测定标本中人白蛋白(ALB)水平。用纯化的人白蛋白(ALB)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人白蛋白(ALB),再与HRP标记的人白蛋白(ALB)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白蛋白(ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白蛋白(ALB)浓度。
 
  人蛋白ELISA试剂盒的性能特点:
 
  1、物理性能
 
  试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气(如有漏气,不影响使用)。
 
  2、剂量反应曲线线性
 
  标准品剂量反应曲线相关系数r值,大于等于0.9900。
 
  3、回收率
 
  分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
 
  4、线性
 
  分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。

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