猴ELISA试剂盒的操作步骤:
1、加入50ul标准品(Standards)、血清标本于相应反应板孔中。
2、每孔加入100ul酶联物(Conjugate),轻轻混匀30秒(重要),室温60分钟。
3、洗板:甩尽板内液体,用蒸馏水或者洗涤液(普通洗涤液,自配)洗涤反应板,并去除水滴(在厚叠吸水纸上拍干);这样反复洗涤5次。
4、每孔加入100ul显色液,轻轻混匀10秒,室温20分钟。
5、每孔加入50ul终止液(StopSolution)。轻轻混匀30秒;30分钟内在450nm处读OD值。
猴ELISA试剂盒的操作注意事项:
1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4、请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6、底物请避光保存。
7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。