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人受体ELISA试剂盒基于什么原理工作?

 更新时间:2024-12-11 点击量:142
  人受体ELISA试剂盒是一种用于检测受体蛋白在样本中含量的试剂盒,其基于ELISA(酶联免疫吸附实验)原理工作。ELISA是一种常用的免疫学实验技术,通过特异性抗体的结合来检测目标蛋白或分子在样本中的含量,其原理包括固相抗原-抗体结合、酶标记的二抗结合和底物显色三个主要步骤。
 
  首先,人受体ELISA试剂盒中的微孔板表面涂覆有特定的抗受体抗体,这些抗体可以与待检测样本中的受体蛋白结合。样本被加入到微孔板中,受体蛋白会与固相抗体结合,形成受体-抗体复合物。经过洗涤步骤后,非特异性结合的物质被洗掉,只有与抗体结合的受体蛋白残留在微孔板中。
 

人受体ELISA试剂盒

 

  接下来,加入酶标记的二抗,该二抗能够与受体蛋白结合并形成二抗-受体复合物。这种二抗通常是与酶如辣根过氧化物酶(HRP)结合的二抗,当二抗与受体蛋白结合后,会在微孔板中形成受体-二抗-HRP复合物。再次进行洗涤步骤,将未结合的二抗排除。
 
  最后,加入底物,底物被酶催化分解产生显色产物。通常使用的底物是TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺),其在酶作用下生成蓝色产物。在反应结束后,加入停止液,停止酶的反应,并使显色产物由蓝色转变为黄色。
 
  最终,通过测量微孔板中产生的黄色产物的吸光度,可以间接反映受体蛋白在样本中的含量。根据标准曲线,可以计算出待检测样本中受体蛋白的浓度。人受体ELISA试剂盒通过这种原理,可以快速、准确地检测样本中受体蛋白的含量,广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。