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人抗体ELISA试剂盒的原理及应用介绍

 更新时间:2023-11-09 点击量:389
  人抗体ELISA试剂盒是一种常用的免疫学实验方法,用于检测体内是否存在特定人类抗体的定量分析。其原理基于酶联免疫吸附法,主要包括固相抗原涂布、样品孵育、抗体结合和检测信号等步骤。
 
  人抗体ELISA试剂盒的基本原理如下:
 
  首先,将待检测抗原或抗体固定在微孔板上。这些固相抗原可以是纯化的蛋白质、多肽、糖类等,或者是细胞滤液、组织提取物等复杂混合物。通过固定,使抗原或抗体与微孔板表面非特异性地结合。
 
  随后,加入待测样品到微孔中,并让其充分接触固相抗原,进行孵育。如果样品中存在与固相抗原或抗体特异性结合的抗体,它们将与固相抗原结合形成抗原-抗体复合物。
 
  然后,洗涤孔内未结合的物质,以去除非特异性结合的成分。这个步骤能有效减少假阳性结果的产生,提高试剂盒的特异性。
 

人抗体ELISA试剂盒

 

  接下来,加入与被检测抗体特异性结合的检测抗体,并使其与复合物发生特异性结合。这样,形成了夹心型结构:固相抗原-待测抗体-检测抗体。再次进行洗涤,以去除未结合的检测抗体。
 
  最后,加入一种与检测抗体结合产生显色反应的底物,一般是染色底物,常见的有TMB或ABTS。底物在酶的作用下发生化学反应,产生可测量的颜色。
 
  通过测量反应物颜色的强度,可以定量分析待测样品中存在的特定人类抗体的浓度。通常使用光密度计或酶标仪对反应颜色进行读取,并将结果与已知浓度的标准曲线相比较,计算出待测抗体的浓度。
 
  人抗体ELISA试剂盒广泛应用于许多领域,包括临床诊断、生物医药研究和生物工程等。具体应用包括:
 
  1、感染性疾病的诊断:ELISA可以检测感染性疾病引起的抗体产生,用于早期感染筛查和疾病诊断。
 
  2、自身免疫疾病的诊断:ELISA可检测自身免疫疾病相关抗体的存在,帮助医生进行疾病诊断和监测治疗效果。